維生素B12鈷胺素ELISA試劑盒

iELisa維生素B12檢測(cè)試劑盒

（C/N: CE2131）

--－北京中檢維康生物技術(shù)有限公司

1. 概要

   維生素B₁₂又叫鈷胺素，是唯義含金屬元素的維生素。自然界中的維生素B₁₂都是微生物合成的，高等動(dòng)植物不能制造維生素B₁₂。維生素B₁₂是唯義的一種需要一種腸道分泌物（內(nèi)源因子）幫助才能被吸收的維生素。有的人由于腸胃異常，缺乏這種內(nèi)源因子，即使膳食中來(lái)源充足也會(huì)患惡性貧血。植物性食物中基本上沒有維生素B₁₂。它在腸道內(nèi)停留時(shí)間長(zhǎng)，大約需要三小時(shí)（大多數(shù)水溶型維生素只需要幾秒鐘）才能被吸收。維生素B₁₂的主要生理功能是參與制造骨髓紅細(xì)胞，防止惡性貧血；防止大腦神經(jīng)受到破壞。

2. 原理

   本試劑盒的測(cè)定是基于免疫學(xué)中抗原抗體特異性反應(yīng)的原理而建立的。微孔板包被有VB₁₂抗原。加入VB₁₂抗體和VB₁₂標(biāo)準(zhǔn)品或樣品提取液。標(biāo)準(zhǔn)品或樣品中提取的VB₁₂能與酶標(biāo)板上的VB₁₂包被原競(jìng)爭(zhēng)性地結(jié)合定量的抗體，沒有結(jié)合的抗體、標(biāo)準(zhǔn)品或樣品中提取的VB₁₂在洗滌步驟中被除去。再加入酶標(biāo)二抗與微孔中的VB₁₂抗體反應(yīng)。洗滌除去沒有反應(yīng)的酶標(biāo)二抗。加入底物溶液溫育，酶標(biāo)記物將無(wú)色的顯色劑轉(zhuǎn)化為藍(lán)色的產(chǎn)物，加入終止液后顏色由藍(lán)色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色，在450nm 處測(cè)量每孔的OD值。OD值與樣品中的維生素B₁₂含量成反比。

3. 試劑盒組成

1)      包被有抗原的96 微孔板： 1 塊（96 孔，12 條×8 孔）

2)      維生素B₁₂標(biāo)準(zhǔn)品：0ng/mL；0.5ng/mL；4.0ng/mL；10ng/mL；50ng/mL1瓶 × 1.0mL

3)      VB₁₂抗體工作液：            1 瓶 × 10mL

4)      酶標(biāo)二抗：                  1 瓶 × 15mL

5)      10× 濃縮洗滌液：             1 瓶 × 50mL

6)      稀釋緩沖液：                 1 瓶 ×50mL

7)      顯色底物：                   1 瓶 ×13mL

8)      終止液：                    1 瓶 × 7mL

  9）  試劑盒說(shuō)明書:      

測(cè)定之前注意事項(xiàng)

使用前將所有試劑平衡至室溫（20-25℃）。

 使用后迅速將試劑放入2-8℃冷藏。

 在ELISA分析中的再現(xiàn)性，很大程度上取決于洗板的一致性，正確的洗板操作是ELISA測(cè)定程序中的要點(diǎn)。

 所有溫育過(guò)程應(yīng)避免陽(yáng)光直射，并按要求用蓋板覆蓋住酶標(biāo)板。

注意事項(xiàng)

1)      室溫低于20℃或試劑及樣品未回到室溫（20- 25℃）會(huì)導(dǎo)致數(shù)值偏低。

2)      在洗板過(guò)程中如果出現(xiàn)板孔干燥過(guò)久的情況，則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。

3)      標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和顯色液對(duì)光敏感，避免直接暴露在光線下。

4)      混合要均勻，洗板要*（包括加樣品和標(biāo)準(zhǔn)液的時(shí)候都必需充分混合均勻）。

5)      終止液為強(qiáng)酸性物質(zhì)，避免接觸皮膚。

6)      不要使用過(guò)了有效期的試劑盒，也不要使用不同批次的試劑盒，這樣會(huì)引起測(cè)定誤差。

7)      試劑盒的儲(chǔ)存條件是2~8℃，切勿冷凍。

維生素B12鈷胺素ELISA試劑盒